Essai n° 442D: Sensibilisation cutanée in vitro

La présente ligne directrice d’essai, basée sur un événement clé, traite du danger pour la santé humaine lié à la sensibilisation cutanée après exposition à une substance chimique testée. La sensibilisation cutanée correspond à une réponse allergique suite à un contact cutané avec une substance testée, telle que définie par le Système Général Harmonisé de classification et d’étiquetage des produits chimiques des Nations unies (SGH de l’ONU). Cette ligne directrice vise à couvrir un événement clé conduisant à la sensibilisation cutanée, à savoir l’activation des kératinocytes. Cet événement clé, dans le cadre de la voie de résultat indésirable (Adverse Outcome Pathway, AOP) menant à la sensibilisation cutanée, se produit dans les kératinocytes et inclut des réponses inflammatoires ainsi que l’expression de gènes associée à des voies spécifiques de signalisation cellulaire, telles que les voies dépendantes de l’élément de réponse antioxydant/électrophile (ARE). Cette ligne directrice propose cinq méthodes d’essai in vitro ciblant le même événement clé de la AOP pour la sensibilisation cutanée : (i) le test KeratinoSens™ basé sur la luciférase ARE‑Nrf2, (ii) le test LuSens basé sur la luciférase ARE‑Nrf2, (iii) les essais de sensibilisation épidermique EpiSensA et Epi2SensA, (iv) le test α‑Sens basé sur la luciférase ARE‑Nrf2. Les tests KeratinoSens, LuSens et α‑Sens sont des méthodes in vitro basées sur la luciférase ARE‑Nrf2, tandis que les EpiSensA et Epi2SensA reposent sur la quantification de l’expression génique par RT‑qPCR (transcription inverse suivie de PCR quantitative) dans des modèles d’épiderme humain reconstruit. Les méthodes proposées sont utilisées pour contribuer à distinguer les sensibilisants cutanés des non‑sensibilisants, conformément au SGH de l’ONU. Des critères de performance ont été développés afin de permettre la validation de méthodes d’essai similaires.