Essai n° 446A : Essai par gènes rapporteurs ToxTracker de caractérisation du danger de génotoxicité et des mécanismes d’action génotoxiques et non génotoxiques

La présente ligne directrice d’essai décrit un essai rapporteur basé sur des cellules souches permettant d’identifier les propriétés génotoxiques des substances chimiques en combinant six gènes rapporteurs fluorescents activés sélectivement par différentes réponses de signalisation cellulaire. Deux de ces réponses de signalisation sont associées à un effet génotoxique direct. Les quatre autres voies de réponse au stress sont associées à des effets cytotoxiques tels que le stress oxydant ou les dommages aux protéines, qui peuvent indirectement conduire à un effet génotoxique. Les six gènes rapporteurs génétiquement modifiés, chacun exprimant un rapporteur marqué par GFP distinct, sont exposés à la substance d’essai en présence et en absence d’une source exogène d’activation métabolique. L’activation des gènes rapporteurs GFP est mesurée par cytométrie en flux. L’induction différentielle de chaque rapporteur par rapport aux cellules témoins contenant le solvant est utilisée pour prédire la génotoxicité et fournir des informations sur le mécanisme d’action génotoxique ou non génotoxique de la substance d’essai. Parallèlement, la cytotoxicité des substances testées est déterminée par le comptage cellulaire relatif dans les cultures exposées à la substance chimique, comparé aux cultures témoins contenant le solvant.